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标准固相多肽合成方法
作者:9159金沙游戏场发表时间:2024-03-01浏览量:217
固相多肽合成法(Solid Phase Peptide Synthesis,SPPS)是一种常用的多肽合成方法,它是由美国生物化学家R. Bruce Merrifield于1963年发明的。这种方法的原理是将氨基酸的羧基通过共价键结合到一个不溶性的聚合物载体上,然后通过迭代添加氨基酸来合成多肽链。
标准固相多肽合成方法的步骤如下:
1. 载体选择:选择合适的聚合物载体,如聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(PS-DVB)或聚酰胺树脂等。
2. 载体活化:将载体与一个活化剂反应,使其表面的羟基或氨基活化,以便与氨基酸的羧基或氨基形成共价键。
3. 氨基酸耦合:将活化的载体与第一个氨基酸反应,使氨基酸的羧基与载体的活化基团形成共价键。
4. 脱保护:使用适当的脱保护剂去除氨基酸的保护基团,暴露出活性氨基,以便与下一个氨基酸反应。
5. 迭代耦合:重复步骤3和步骤4,依次添加剩余的氨基酸,直到合成出目标多肽。
6. 切割和脱保护:使用强酸或碱将多肽从载体上切割下来,并去除所有氨基酸的保护基团。
7. 纯化:通过高效液相色谱(HPLC)等方法对合成的多肽进行纯化。
8. 结构鉴定:通过质谱、核磁共振等方法对纯化的多肽进行结构鉴定。
固相多肽合成法具有操作简便、产率高、纯度好等优点,是目前最常用的多肽合成方法之一。然而,这种方法也存在一些问题,如聚合难度大、成本高、副反应多等,需要通过优化反应条件和工艺来解决。
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