多肽固相合成法（Solid-Phase Peptide Synthesis，简称SPPS）是一种在固体载体上逐步合成多肽链的方法。这种方法由美国生物化学家罗伯特·布鲁斯·梅里菲尔德（Robert Bruce Merrifield）于1963年发明，他因此获得了1984年的诺贝尔化学奖。多肽固相合成法具有操作简单、产率高、纯度好等优点，已成为多肽合成的主流方法。

多肽固相合成法的基本步骤如下：

1. 选择固体载体：常用的固体载体有聚苯乙烯树脂、聚丙烯酰胺树脂等。载体表面有许多活性基团，可以与氨基酸的羧基发生反应，将氨基酸固定在载体上。

2. 氨基酸的保护：在合成过程中，为了避免氨基酸之间的副反应，需要对氨基酸的氨基和羧基进行保护。常用的氨基保护基有叔丁氧羰基（t-Boc）和芴甲氧羰基（Fmoc），羧基保护基有酯基。

3. 活化氨基酸：为了促使氨基酸与载体或已固定的氨基酸发生反应，需要将氨基酸的羧基活化。常用的活化方法有碳二亚胺法、活泼酯法等。

4. 缩合反应：将活化的氨基酸与载体或已固定的氨基酸发生缩合反应，形成肽键。这一步通常使用弱碱如二异丙基乙胺（DIEA）作为催化剂。

5. 脱保护：在完成一次缩合反应后，需要去除氨基保护基，使下一个氨基酸能够继续反应。对于t-Boc保护基，可以使用强酸如氟化氢；对于Fmoc保护基，可以使用弱碱如哌啶。

6. 重复步骤3-5：通过多次重复活化、缩合和脱保护的步骤，逐渐延长多肽链。

7. 切割和脱保护：当多肽链达到目标长度后，需要将其从载体上切割下来，并去除所有保护基。这一步通常使用强酸如氟化氢或者氢氟酸/三氟乙酸混合物。

8. 纯化和分析：切割下来的多肽需要通过高效液相色谱（HPLC）等方法进行纯化，然后通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）等技术进行结构分析。

多肽固相合成法具有很高的灵活性，可以通过改变氨基酸的种类和顺序，合成各种不同结构和功能的多肽。这些多肽在生物研究、药物开发、材料科学等领域具有广泛的应用。

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