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抗菌肽设计

作者:9159金沙游戏场发表时间:2022-09-02浏览量:1069

Protaetiamycine是一种昆虫防御素,是一种天然存在的43-氨基酸残基的抗菌肽,来源于白星天牛幼虫。在以前针对开发抗菌肽的工作中,我们设计了抗菌肽的9聚体类似物。其中,RLWLAIGRG-NH2对白色念珠菌具有良好的抗真菌活性。在本研究中,我们根据 RLWLAIGRG-NH2序列设计了四种9-mer 肽类似物,其中 Gly 或 Ile 被 Arg,Lys 或 Trp 取代,以优化肽的疏水性和阳离子性之间的平衡并增加细菌细胞选择性。我们测量了它们对细菌和哺乳动物细胞的毒性以及它们透化模型磷脂膜的能力。在 C- 末端(9Pbw1)用精氨酸代替 Gly9导致抗菌活性提高2-4倍。用 Lys (9Pbw2和9Pbw4)进一步取代 Gly7导致抗菌活性提高4至8倍而不增加细胞毒性,而用 Trp (9Pbw3)取代 Gly7增加细胞毒性以及抗菌活性。具有最高细菌细胞选择性的肽9pbw2和9pbw4不能有效去除金黄色葡萄球菌细胞质膜的极化,并且几乎不会泄漏包裹在囊泡内的荧光染料。凝胶阻滞实验表明,9Pbw2和9Pbw4在浓度 > 20μM 时抑制 DNA 的迁移。在9Pbw2和9Pbw4的 C 末端有三个带正电荷的残基,可以促进细菌负电荷磷脂膜的有效渗透。研究结果表明,9Pbw2和9Pbw4这两种有效的抗菌肽的杀菌作用可能与细菌细胞膜穿透后抑制细胞内成分的功能有关。

抗菌肽设计序列.jpg

抗菌肽是所有生物先天免疫系统的重要组成部分。许多这些肽通过引起膜透化迅速杀死入侵的病原体,尽管这可能不是它们唯一的作用方式。由于这些多肽具有不同于其他治疗性抗生素的作用机制,因此前者可能构成一类有吸引力的新药,用于对抗目前可用的抗生素产生耐药性的微生物。无脊椎动物(尤其是昆虫)的先天免疫系统揭示了抗微生物肽对其防御的重要性。昆虫对细菌感染具有极强的抵抗力。昆虫体内大多数这种防御肽都是在其脂肪体或血细胞中产生,然后释放到血淋巴中[8,9]。这些肽已知在体液防御反应中起重要作用。到目前为止,已在昆虫中鉴定出200多种抗菌肽。大部分来自昆虫的抗微生物肽可分为三类。最大的类别包括与分子内胱氨酸二硫键形成发夹样 β-片或 α-螺旋/β-片混合结构的肽。第二组具有两亲 α-螺旋结构,第三组包含富含脯氨酸或富含甘氨酸的肽。

抗菌肽设计抗菌活性.jpg

在昆虫中,防御素包括一大类富含半胱氨酸的阳离子抗微生物肽,对革兰氏阳性细菌和丝状真菌有抗性[17,18]。这些富含半胱氨酸的肽具有多种功能特性,具有潜在的治疗作用。我们先前已经从甲虫幼虫中鉴定出一种新的昆虫防御素,命名为丙泰霉素[1]。为了开发治疗性肽类抗生素,根据从 Ala22到 Gly30的蛋白序列,合成了普罗泰霉素(ACAAHCLAIGRG-NH2)及其9聚体衍生物中 Ala19到 Gly30的12聚体肽段。在这六种类似物中,ALWLAIGRG-NH2(即9Pbw0)显示出比抗真菌素 B 更强的抗真菌活性


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