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固相多肽合成终点检测
作者:9159金沙游戏场发表时间:2024-01-30浏览量:261
固相多肽合成(SPPS)是一种在固体支持物表面进行多肽链合成的方法。在这个过程中,每一步反应的产物都固定在固体支持物上,未反应的物质可以通过过滤或洗涤的方式去除,从而简化了纯化步骤。然而,由于各种原因,如反应不完全、副反应等,使得合成的多肽链长度和纯度不一,因此需要进行终点检测。
固相多肽合成终点检测主要是通过检测反应体系中的游离氨基来判断合成反应是否完成。常用的方法有氯胺T法、三硝基苯磺酸法、荧光法等。
氯胺T法是一种经典的检测方法,其原理是氯胺T可以与游离氨基反应生成黄色的化合物,通过测定其在420nm处的吸光度,可以推算出游离氨基的含量,从而判断反应是否完成。
三硝基苯磺酸法也是一种常用的检测方法,其原理是三硝基苯磺酸可以与游离氨基反应生成黄色的化合物,通过测定其在340nm处的吸光度,可以推算出游离氨基的含量,从而判断反应是否完成。
荧光法则是通过荧光标记的氨基酸与游离氨基反应,生成荧光物质,通过测定其荧光强度,可以推算出游离氨基的含量,从而判断反应是否完成。
总的来说,固相多肽合成终点检测是一个重要的过程,它可以帮助我们判断合成反应是否完成,以及合成的多肽链的质量和纯度,对于多肽药物的研发和生产具有重要的意义。
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